検疫病原体の蔓延は、世界の作物生産に重大なリスクをもたらし、作物の健康を脅かし、農業生態系を混乱させます。アウトブレイクを防ぐには、タイムリーかつ正確な現場検出が重要です。-リコンビナーゼポリメラーゼ増幅 (RPA) および多成分 DNAzyme (MNAzyme) は、有望な等温検出技術です。しかし、RPA は二本鎖 DNA (dsDNA) を生成するため、MNAザイムの活性化には一本鎖 DNA (ssDNA) が必要であるため、その統合は妨げられてきました。-これに対処するために、私たちは、非対称 RPA (aRPA) と MNAzyme を組み合わせた革新的なワンポット プラットフォームである OAR{6}}MNA バイオセンサー-を開発しました。-ターゲットのリサイクルを支援します。このバイオセンサーは、ウリ科の細菌性果実斑点 (BFB) の原因物質である Acidovorax citrulli を検出するために適用されました。 RPA プライマー濃度を調整することで、aRPA は豊富な ssDNA を生成し、検出限界 20 コピー/μL と完全な特異性で A. citrulli の視覚的検出を可能にし、蛍光 RPA の性能を上回ります。バイオセンサーは、種子サンプルにおける qPCR と 100% の一致を示し、スパイクされたメロンホモジネートにおいても堅牢な性能を維持しました。私たちの比較分析により、検出コストの削減や現場での適用性の向上など、OAR{16}}MNA システムの利点が明らかになりました。ポータブル DNA 分析装置と組み合わせると、バイオセンサーはユーザーフレンドリーな結果 (+/-) を提供し、-現場での導入に最適です。- BFBを超えて
OAR-MNA は、キュウリ作物の生産に深刻な損失をもたらす RNA 検疫病原体であるキュウリ グリーンモットル モザイク ウイルス (CGMMV) の検出に適用され、成功しました。 OAR{2}}MNA バイオセンサーは、早期かつ正確な現場診断を可能にすることで植物病原体検出技術の進歩を表し、世界の作物生産を保護するための有望なツールを提供します。
