MIRA DNA等温急速増幅キットは、室温と一定温度の両方で高度な核酸増幅技術を利用しています(通常は39ºC〜42ºC)。補助タンパク質と一本鎖結合タンパク質の助けを借りて、リコンビナーゼとプライマーは、標的相同性ドメインを検索して結合する複合体を形成します。これにより、相同位にDループ領域が形成され、鎖交換が開始されます。リコンビナーゼが複合体から解離すると、ポリメラーゼはプライマーの3 '末端に結合し、鎖延長プロセスを開始します。さらに、エキソヌクレアーゼ活性を活用することにより、キットはテンプレート用に設計された特定の分子プローブを使用して、蛍光検出装置を介したターゲットフラグメント増幅プロセスのリアルタイムモニタリングを可能にします.
【特徴】
高感度
このキットは、核酸増幅の優れた感度と特異性を提供します。
速い反応時間
増幅プロセスにはわずか20分かかり、迅速な結果が得られます。
便利なストレージとハンドリング
反応成分は乾燥粉末の形で、保管して扱いやすいです。
幅広い互換性
さまざまな蛍光定量的PCR機器、一定温度蛍光増幅システムと互換性があります。
【プライマーデザイン】
最適なパフォーマンスのために、プライマーは30-35 bpの長さでなければなりません。短いプライマーは、増幅速度と検出感度を低下させる可能性があります。プライマー設計では、増幅を妨げる可能性のある二次構造を回避する必要があります。推奨されるアンプリコンの長さは150-300 bpです。
【蛍光プローブ設計】
蛍光プローブは、特定のプライマー認識部位と重複してはなりません。長さが46-52 ntである必要があり、パリンドロームシーケンス、内部二次構造、および連続的な反復塩基を回避します。プローブ設計には、4つの変更サイトが含まれています。
- A dspacer(Tetrahydrofuran、Thf)5 '末端から約30-35 ntで、エキソヌクレアーゼの認識部位として機能します。
- A 蛍光群THFサイトの上流とラベル付けされています。
- A クエンチンググループ蛍光群とは別に、下流の2-4 ntに配置されています。
- プローブの3 '端にはブロッキンググループ(たとえば、アミン基、リン酸グループ、またはc 3-スペーサー)、3 '末端から約15 nt離れています。
【キット構成】
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Cオムポシション |
Content |
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バッファー |
1.6ml×1チューブ |
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Bバッファー |
150μL×1チューブ |
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POsitive Controlテンプレート |
100μl×1チューブ |
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POsitive Controlプローブとプライマー Mix |
70μl×1チューブ |
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試薬 |
48T |
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ガイドマニュアル |
1コピー |
【梱包仕様】
- 仕様:48 t/pack
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