このキットは、室温と一定温度範囲（通常39度〜42度）で動作する等温核酸増幅技術を利用します。このプロセスは、特定のプライマーを使用したRNAテンプレートからの相補的DNA（cDNA）を合成する逆転写酵素から始まります。補助タンパク質と一本鎖結合タンパク質によって支援されたリコンビナーゼとプライマーによって形成された複合体は、ターゲット相同性ドメインを検索して結合します。これにより、相同位にDループ領域が形成され、鎖交換が開始されます。リコンビナーゼが解離すると、ポリメラーゼはプライマーの3 '端に結合し、鎖の拡張を開始します。このキットは、蛍光検出装置を介した増幅プロセスのリアルタイムモニタリングのために、エキソヌクレアーゼ活性と特定の分子プローブも利用しています。
【特徴】
高感度
正確なRNA増幅用に設計され、正確な検出が確保されます。
速い
反応はわずか20分で完了し、迅速な増幅を提供します。
安定した
ドライパウダーフォーマットは、取り扱いと保管を簡素化します。
幅広い互換性
さまざまな蛍光量的PCR機器、一定温度蛍光アンプ、およびその他の蛍光検出装置と互換性があります。
【プライマーデザイン】
最適なパフォーマンスのために、プライマーは30〜35 bpの長さでなければなりません。より短いプライマーは、増幅速度と感度に影響を与える可能性があります。プライマーは、増幅プロセスを妨げる可能性のある二次構造を回避するように設計されています。推奨されるアンプリコンの長さは150〜500 bpです。
【蛍光プローブ設計】
プローブシーケンスは特定のプライマー認識部位と重複せず、長さは46-52 ntであり、シーケンスはパリンドロームシーケンス、内部二次構造、連続した繰り返しベースを回避します。プローブには4つの修正サイトがあります。エキソヌクレアーゼの認識部位;蛍光群はTHFサイトの上流にマークされ、消光群は下流にラベル付けされ、2つのグループ間の距離は2-4 ntです。 THFは3 '端から約15 nt離れており、3'端には、アミン群、リン酸塩グループ、またはC 3-スペーサーなどのブロッキンググループが付いています。
【キット構成】
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Cオムポシション |
Content |
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バッファー |
1.6 ml×1チューブ |
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Bバッファー |
150μl×1チューブ |
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試薬 |
48T |
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ガイドマニュアル |
1コピー |
注記：核酸分解の問題を考慮すると、RNAシリーズ製品は陽性対照テンプレートとプライマープローブを提供しません。
【梱包仕様】
- 仕様：48 t/pack
【KITストレージ】
- ストレージ条件：一定の温度環境で-20ºC以下で保存します。光を避け、重い圧力を避けてください。
- 貯蔵寿命：14か月。
【注記】
- MIRAプロジェクト開発のために、自己設計されたプライマー/プローブを追加する必要があります。
- キットには、DNAとRNAの2つのタイプがあります。 RNAタイプには、逆転写酵素が含まれており、RNA、dsDNA、およびssDNAによる増幅をテンプレートとして可能にします。 DNAタイプは、テンプレートとしてDSDNAでのみ増幅できます。
- 基本、蛍光、テストストリップの3つのタイプがあります。ニーズに基づいて適切なキットを選択し、対応するプライマー/プローブを使用します。
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